Jak se provádí cytologie u psa?

Cytologické vyšetření kůže je rychlá a diagnosticky cenná výzkumná metoda. Tento typ studie se často používá pro exsudativní léze a seborrheu. Existují přímé a nepřímé metody pro získání vzorku. Při přímém způsobu získání se podložní sklíčko těsně přitlačí přímo na postiženou oblast (vředy, eroze, krusty, pustuly, plaky, papuly, uzliny, píštěle). Předtím je povrch lehce zpracován, aby se nejprve identifikovaly reprezentativní buňky. Přímé lze také provést z povrchu vzdálených lézí pro rychlou identifikaci v případech podezření na nádor nebo zánětlivý proces. Nepřímá metoda odběru vzorku využívá tampon, kyretu nebo čepel skalpelu. Postižené místo se lehce seškrábne nástrojem namočeným v minerálním oleji, přiloží se na něj sklíčko a jemně se „roztáhne“, aniž by došlo k poškození buněk. Nepřímé se častěji používají u mokvajících poranění a na těžko dostupných místech kůže (například uši a tlapky).

Aspirace tenkou jehlou je rychlý, levný a minimálně invazivní způsob vyšetření nodulárních lézí, kožních nádorů a zvětšených lymfatických uzlin. Během aspirace se do vzorku uvolní malý počet buněk, což nemusí být indikativní a neposkytne žádnou informaci o tkáňové architektuře a invazivitě. Cytologické vyšetření kůže je proto screeningovou metodou a nenahrazuje biopsii a histologické vyšetření.

Předanalýza:

1. Přiložte sklo na postižený povrch kůže, abyste získali otisk.

2. Umístěte sklenici materiálem nahoru do plastové nádoby pro přepravu a označte ji jménem majitele, druhem a jménem zvířete.

3. Skladování vzorků je 5 dní při +2°C…+8°С.

4. Označte kontejner pro přepravu a sklo svým celým jménem. majitel, jméno zvířete, uveďte lokalizaci, vyplňte formulář doporučení s uvedením kódu klienta.

5. Teplotní podmínky pro přepravu do laboratoře: +2°С…+8°С (modré balení).

Výsledky studie obsahují informace pouze pro lékaře. Diagnóza se provádí na základě komplexního posouzení různých ukazatelů a dalších informací.

Lék se vyšetřuje na přítomnost leukocytů, erytrocytů, jaderného epitelu, fagocytózy, na přítomnost mikroflóry, Malassezia a případně na přítomnost dalšího materiálu. Poznámky naznačují přítomnost dalších typů buněk (akantolytické, žírné, plazmatické buňky, fibroblasty) a objasňují převahu leukocytárních populací.
Při interpretaci výsledků cytologického vyšetření kůže se posuzuje složení a poměr buněčného složení a také mikroflóra. Nález velkého počtu různých typů buněk (neutrofily, eozinofily, lymfoidní buňky, monocyty/makrofágy, epiteliální buňky a fibroblasty) svědčí pro přítomnost akutního zánětu. Detekce významného počtu monocytů, stejně jako lymfocytů a plazmatických buněk, naznačuje chronický průběh zánětlivého procesu. Přítomnost malého počtu lymfocytů a plazmatických buněk je běžná u jakékoli formy zánětlivého procesu v kůži, ale detekce velkého počtu z nich může znamenat neoplazii nebo pododermatitidu. Během vývoje neoplastických procesů se mohou objevit i reaktivní fibroblasty a epiteliální buňky. Volné bakterie indikují kontaminaci vzorku, ale fagocytóza bakterií indikuje patogenitu mikroorganismu a je známkou infekčního procesu. Degenerativní neutrofily v nátěru (karyorexie a velká fragmentovaná jádra bez cytoplazmy) a přítomnost mikroflóry svědčí pro pyodermii, zatímco přítomnost nedegenerativních neutrofilů s pyknotickými jádry (tmavě zbarvená se shlukovanými segmenty) svědčí pro sterilní zánět. Detekce akantolytických buněk může naznačovat rozvoj autoimunitního onemocnění. Akantolytické buňky se sice mohou vyskytovat i u bakteriálních a plísňových infekcí. Detekce velkého počtu bakterií a epiteliálních buněk může naznačovat růst rezistentní mikroflóry a snížení ochranných vlastností imunitního systému těla. Přítomnost eozinofilů v nátěru potvrzuje alergickou reakci, furunkulózu, eozinofilní granulomový komplex u koček. Eozinofily a mastocyty v nátěru se nacházejí v mastocytomu. Přítomnost významného počtu Malassezia dermatitidy ukazuje na přítomnost Malassezia dermatitidy. Pyogranulomatózní zánět může být spojen s méně častými bakteriálními a plísňovými infekcemi.

Při průkazu buněk se známkami atypie se doporučuje cytologické vyšetření kvalifikovaným cytologem.

Jednotky: nezjištěno nebo zjištěno (výsledek je označen křížky nebo čísly v zorných polích).

pro cytologické analýzy ve veterinární medicíně Běžně se používají následující nástroje:

Vyčistěte jednorázové brýle

Jehly o průměru 18-22Ø

Sterilní nádobky (pokud objem tekutiny přesahuje 10 ml)

Je vhodné použít 5% roztok citrátu sodného nebo EDTA, aby se zabránilo koagulaci materiálu

Metody odběru materiálu pro cytologické vyšetření:

Otiskové stěry: pro cytologické vyšetření lze připravit odběrem z vnější vrstvy živých zvířat nebo tkání odebraných během operace nebo nekroskopie. Snadno se získávají a vyžadují minimální zručnost, ale touto metodou se získá méně buněk než se seškrabováním a je zde větší míra cizích nečistot ve formě bakterií a jiných buněk než při odběru tečkovitých teček. V důsledku toho stěry otisků prstů často odrážejí pouze sekundární bakteriální infekci nebo tkáňovou dysplazii způsobenou zánětlivým procesem. Je také důležité vzít v úvahu, že při odběru materiálu z ulcerózního, zaníceného povrchu je nutné sejmout otisk prstu PŘED ČIŠTĚNÍM povrchu. .

Tkáňové seškraby: tento způsob odběru materiálu má tendenci shromažďovat velké množství buněčného materiálu, což je zvláště důležité, když je materiálem tvrdá tkáň obsahující málo buněk (například kostní tkáň nebo kalcifikace tkáně jsou odebírány několika). translační pohyby skalpelu pomocí čepele kolmé na látku.

Výtěry pro cytologické vyšetření ve veterinární diagnostice se používají především k vyšetření poševních stěrů na ovulaci. Po odebrání materiálu sterilní urogenitální sondou je třeba jej jemnými, plynulými pohyby otočit podél skla a odeslat do laboratoře. NENÍ MOŽNÉ třít (ještě prudčeji) sondu o sklo! To povede k masivní destrukci buněk a zaručí tak falešný výsledek testu.

Biopsie tkáně je „zlatým standardem“ ve veterinární cytologii, protože umožňuje:

-získejte buňky požadovaného typu

– získat buňky v libovolném množství

– eliminuje bakteriální kontaminaci

-lze získat, včetně z vnitřních orgánů, pod kontrolou ultrazvuku.

– eliminuje kontaminaci materiálu krví a jinými tkáněmi.

Při použití jakékoli metody je třeba vzít v úvahu, že buněčný materiál musí být skladován při teplotě +4 – + 7 ° C

Nejčastější chyby při odběru materiálu na cytologický rozbor jsou:

-Cytologie by se neměla odebírat z nekrotické tkáně nebo tkáně s nadměrnou úrovní zánětu, protože to povede k nereprezentativnímu vzorku buněk

-Materiál musí být shromážděn alespoň na 3 sklenicích, nejlépe z různých míst, aby se získal přesný a spolehlivý buněčný obraz procesu

-Přítomnost přebytečné periferní krve vede k ředění buněk a činí materiál neinformativním Příčinou výskytu přebytečné krve je obvykle použití příliš velkých jehel, nebo je jehla příliš ponořena do tkáně nebo zůstává. tam příliš dlouho.

-Tato aplikace materiálu na sklo je kritická Materiál musí být aplikován na sklo ihned po jeho odběru, aby nedošlo k jeho vysychání a vytvoření buněčné sraženiny. takže pokud je materiál mnohem lepší, naneste jej na několik sklenic

Exsudátové tekutiny a transsudáty.

Materiál se odebírá punkcí do čisté sterilní nádoby, maximální možné množství. Je nezbytné shromáždit a odeslat do laboratoře konečnou frakci kapaliny, která je nejbohatší na buňky.

Aby se materiál nesrazil ihned po odběru tekutiny, je lepší jej nabrat do zkumavky s K3EDTA (klinická zkumavka), protože antikoagulant zabrání tvorbě buněčné sraženiny.

Pokud lze materiál odebrat ve větším množství, doporučujeme jej zaslat také na mikrobiologické a virologické vyšetření, abyste získali úplnější obrázek o diagnóze.

Otiskové stěry: pro cytologické vyšetření lze připravit odběrem ze zevního povlaku

Provádíme cytologické vyšetření tečkovitosti z orgánů a tkání, tečkovitosti kůže a mléčných žláz, provádíme studium exsudátů, transudátů, sekretů, vyšetřujeme stěry a otisky z erozí, vředů, píštělí Vyšetřujeme sputum, výtok z dělohy Provádíme cytologické vyšetření moči.